## 前言

类器官，作为生物医学领域的“明星模型”，在疾病机制研究、药物筛选和精准医疗中展现出极大的潜力。然而，不少科研人员在尝试类器官培养时，常常面临“无法形成结构”、“细胞活性低”、“传代失败”等问题。深入探究究其原因，发现培养体系中细胞因子的选择与配比或许是成功与否的关键。接下来，我们将结合类器官经典培养方案WENR（Wnt3a、EGF、Noggin、R-Spondins），解析这“四大护法”如何各显神通，助力你的类器官培养之路。

## WENR方案的经典之处

WENR方案最初由荷兰Hubrecht研究所的Hans Clevers团队开发，包含Wnt-3a、EGF、Noggin和R-Spondins，被誉为类器官培养的“四大护法”。该方案在类器官研究与实践中不断演化，通过与其他细胞因子或小分子抑制剂的巧妙结合，形成了适用于多种类器官构建的培养条件。目前，WENR方案已在肠胃、小肠、结肠、胰腺、肝脏等多种类器官的培养中得到了广泛运用。

## WENR“四大护法”解析

**1. Wnt-3a：干细胞增殖的“发动机”**

Wnt-3a作为经典Wnt通路的激活剂，通过稳定β-catenin蛋白，启动下游靶基因（如c-Myc、Cyclin D1），参与细胞的发育、增殖和分化过程。不添加Wnt-3a，类器官在超过三天后无法存活，这展示出其在小鼠结肠类器官建立过程中的关键作用。

**2. EGF：细胞增殖的“加速器”**

表皮生长因子（EGF）通过与受体结合，激活MAPK/ERK通路，促进细胞的增殖和存活。EGF在类器官形成过程中能显著增加其体积，并在胃肠道、肝脏、甲状腺等多个类器官培养中被广泛应用。然而，EGF并非必需因子，但其对于促进细胞集落的形成和组织结构的稳定具有重要作用。

**3. Noggin：抑制分化的“守门员”**

Noggin作为骨形态发生蛋白（BMP）的内源性抑制剂，通过阻断BMP与受体结合，促进干细胞的增殖，确保类器官形成所需的充足细胞。此外，Noggin在类器官培养中还与Wnt-3a和R-Spondins共同作用，促进类器官的生长与分化。

**4. R-Spondins：Wnt信号的“放大器”**

R-spondin通过增强Wnt信号的表达，促进干细胞的增殖与类器官结构的形成。缺乏R-spondin的类器官在短时间内就会停止生长，从而展示出其在类器官培养中的不可或缺性。

## WENR实战避坑Tips

对于类器官的培养，需严格控制Wnt-3a的浓度，避免过度激活引起的结构紊乱。同时，R-Spondin需与Wnt-3a联用，单独使用的效果有限。EGF使用时建议选择无血清培养基，以防其被蛋白酶降解。定期更换培养基，以防高浓度EGF诱导异常分化。在肿瘤类器官的研究中，EGF浓度应根据癌细胞的特性进行调整。

基于此，尊龙凯时能够为您提供GMP级细胞因子，确保实验的顺利进行。大幅提升您的实验成功率，使类器官培养的每一步都更加可靠。